Test diagnostici della COVID-19

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Tamponi sterili per la ricerca di laboratorio su campioni di Coronavirus SARS-CoV-2

I test diagnostici per la malattia COVID-19 sono l'insieme degli esami clinici, esami radiologici (ad esempio la tomografia computerizzata) ed esami di laboratorio (ad esempio il tampone rinofaringeo) utilizzati per diagnosticare la malattia causata dal coronavirus SARS-CoV-2. I campioni possono essere analizzati mediante test di reazione a catena della polimerasi dopo trascrizione inversa per il rilevamento di RNA virale (RT-PCR) o mediante test basati su anticorpi ELISA per il rilevamento di proteine virioniche.

La ricerca europea EVA (European Virus Archive) si è rapidamente organizzata per fornire ai laboratori diagnostici di tutto il mondo elementi virali destinati a fungere da controlli per test basati sull'RNA o sulle proteine.[1]

Il 25 febbraio 2020, la Cina ha annunciato di aver prodotto 1,7 milioni di test ad acido nucleico e 350 000 kits test anticorpali ogni giorno.[2]

Test genetici[modifica | modifica wikitesto]

RT-PCR[modifica | modifica wikitesto]

Uno dei primi test RT-PCR è stato sviluppato presso L'Ospedale Universitario della Charité a Berlino nel gennaio 2020 utilizzando la PCR quantitativa e ha costituito la base di 250 000 kits distribuiti dall'OMS[3]. Il 2 marzo l'OMS ha pubblicato un protocollo standard elaborato dall'Institut Pasteur di Parigi[4]. Secondo uno studio coreano, quest'ultimo test ha una sensibilità inferiore alla rilevazione del gene N.[5]

La società sudcoreana Kogenebiotech[6] ha annunciato l'11 febbraio 2020[7] che il proprio kit di rilevamento PowerChek 2019-Ncov ™ Real-Time PCR Kit, che mira al gene "E" appartenente a tutti i betacoronavirus e il gene RdRp specifica del SARS-CoV-2,[8] aveva ricevuto l'autorizzazione d'uso urgente dalle autorità coreane e americane.

Anche altre aziende come Seegene[9] e Solgent[10] hanno sviluppato nel febbraio 2020 le loro versioni dei kit di rilevamento della qualità clinica chiamati rispettivamente "DiaPlexQ" e "Allplex 2019-nCoV Assay".

Negli Stati Uniti, il Centers for Disease Control distribuisce il test diagnostico Real-Time RT-PCR CDC 2019-Nuovo Coronavirus (2019-nCoV) ai laboratori di sanità pubblica[11]. Nelle prime versioni, uno su tre test genetici aveva dato risultati inconcludenti al CDC di Atlanta; test più recenti, utilizzanti due componenti, sono stati annunciati come affidabili il 28 febbraio 2020, consentendo ai laboratori nazionali e locali di completare rapidamente i test.[12] Questo test è stato approvato dalla Food and Drug Administration (FDA) con un'autorizzazione all'uso di emergenza.

L'Università della scienza e della tecnologia di Hong Kong proposto all'inizio del mese di febbraio un test RT-PCR microfluidico molto rapido.[13]

Il 4 marzo 2020, l'OMS ha elencato i seguenti laboratori ufficiali di riferimento e i protocolli di sviluppo:[14]

Paese Istituto Obiettivi genetici
Germania Germania Ospedale universitario della Charité RdRp, E, N
Cina Cina CDC cinese ORF 1ab e nucleoproteina (N)
Stati Uniti Stati Uniti CDC americano Tre bersagli nel gene N.
Francia Francia Institut Pasteur, Parigi Due bersagli nel gene RdRp, E.
Hong Kong Hong Kong HKU ORF1b-nsp14, N
Giappone Giappone Istituto nazionale di malattie infettive Proteina Spike (Peplomer)
Thailandia Thailandia National Institute of Health N

Raccolta di campioni[modifica | modifica wikitesto]

Il test RT-PCR in tempo reale può essere eseguito su campioni respiratori ottenuti con vari metodi, tra cui un tampone rinofaringeo o un campione di espettorato.[15][16] I risultati sono generalmente disponibili entro poche ore o 2 giorni.[17]

Hong Kong ha messo in atto un sistema gestionale affinché i pazienti possano effettuare il test da casa: il pronto soccorso fornisce una provetta al paziente all'interno della quale inserisce un campione di saliva, restituendola per ottenere il risultato del test.[18]

L'NHS britannico ha anche annunciato che inizierà a testare casi sospetti a casa, evitando il rischio di infettare altri individui presenti in ospedale e di disinfettare l'ambulanza qualora dovesse essere usata.[19]

Analisi metagenomica[modifica | modifica wikitesto]

Il test "Respiratory Explify" di IDbyDNA è una prova di analisi metagenomica in grado di identificare più di 900 elementi patogeni respiratori, tra cui SARS-CoV-2. L'analisi dei dati effettivi richiede meno di un'ora; il tempo di attesa tra la ricezione del campione e il risultato del test è di 36 ore,a ma risulta più costoso dei test RT-PCR.[20]

Test sierologici per ricerca anticorpi anti COVID-19[modifica | modifica wikitesto]

Il test sierologico è uno strumento che permette di verificare se l’organismo è entrato in contatto con il virus e quindi se ha sviluppato contro di esso i relativi anticorpi. In sintesi, il test sierologico misura una risposta del sistema immunitario all’infezione.

Esistono due varietà di test sierologici: il test rapido viene realizzato attraverso il prelievo capillare di una goccia di sangue, comunemente definito "pungidito"; la sua funzione è quella di verificare se l'organismo ha prodotto una risposta anticorpale e quindi valutare se la persona è entrata in contatto con il virus. Questo tipo di test dà esito dopo 15 minuti. Il test quantitativo, invece, viene realizzato attraverso un prelievo venoso e oltre a individuare la presenza degli anticorpi nell'organismo né individua anche le quantità; entrambi rilevano gli anticorpi IgM, IgA e IgG.[21]

In caso di infezione le immunoglobuline IgM sono quelle che l’organismo produce per prime ed il loro livello nell'organismo diminuisce con il passare del tempo mentre cominciano ad aumentare le IgG. Se il test rileva delle IgG, significa che l'infezione si è già verificata da diverso tempo; le IgG rimangono nel sangue per tutta la vita come memoria immunologica.

Secondo l’Istituto Superiore di Sanità il tampone nasofaringeo risulta l’unico strumento affidabile per accertare l’infezione da COVID-19. I test sierologici non sono affidabili quanto i tamponi, poiché essi non diagnosticano infezioni molto recenti.[22]

Differenza tra test sierologico e tampone nasofaringeo[modifica | modifica wikitesto]

Il tampone viene utilizzato per diagnosticare l’infezione in corso in quanto verifica nel momento in cui ci si sottopone al tampone se nelle vie aeree è presente il virus. Se vi è infezione in atto il tampone risulterà positivo.

Il test sierologico, invece, non verifica se una persona è affetta da Coronavirus nel momento in cui si sottopone al test, ma rileva soltanto gli anticorpi che l’organismo ha prodotto contro il virus. Se gli anticorpi vengono trovati, infatti, significa che il soggetto è venuto a contatto con il virus, ma non è idoneo a determinare se l'infezione è in atto.

Il tampone valuta se nel momento in cui ci si sottopone si è positivi al Covid-19, il test sierologico valuta solo la risposta immunologica eventualmente prodotta.[23]

Il primo test immunologico è stato descritto da un team dell'Istituto di virologia di Wuhan il 17 febbraio 2020.[24][25]

Il 25 febbraio, un team della Scuola di medicina Duke – NUS di Singapore ha annunciato un altro test anticorpale per SARS-CoV-2 che potrebbe fornire risultati in pochi giorni.[25][26]

Il 28 febbraio 2020, un'altra società sudcoreana denominata PCL ha presentato una richiesta di designazione in via accelerata al Ministero sudcoreano della sicurezza alimentare e farmaceutica per il proprio kit di rilevamento basato su anticorpi " COVID-19 Ag GICA Rapid ". A differenza di un kit di rilevamento basato su RT-PCR in tempo reale, la PCL afferma che il proprio kit basato su anticorpi potrebbe fornire il risultato diagnostico in 10 minuti.

Imaging radiologico[modifica | modifica wikitesto]

Lo scanner polmonare, uno strumento di imaging di routine per la diagnosi di polmonite, è veloce e relativamente facile da eseguire oltre all'esame clinico, senza essere un test di rilevazione virale in senso stretto. Una ricerca ha rivelato che l'accuratezza di questo metodo per la rilevazione di COVID-19 è del 98%, rispetto all'accuratezza del 71% per RT-PCR.[27] Per questo studio, i ricercatori dell'ospedale Tongji di Wuhan, in Cina, si sono impegnati ad analizzare il valore diagnostico e la coerenza dell'imaging toracico rispetto al test RT-PCR per la diagnosi di COVID-19.

Esecuzione dei test[modifica | modifica wikitesto]

Luoghi e condizioni[modifica | modifica wikitesto]

In Francia, ad esempio, il rilevamento viene effettuato negli ospedali[28]. Il ritardo è relativamente lungo perché è necessario inviare i campioni a uno dei 120 centri di rilevamento[29] ed eseguire il test che attualmente richiede mezza giornata. Per limitare la diffusione, sarebbe preferibile che le strutture ospedaliere della città avessero mezzi mobili[30][31] di rilevazione, che accelererebbero lo screening consentendo la rilevazione anche prima della comparsa di sintomi.[32] Secondo l'Imperial College di Londra, sarebbe effettivamente necessario bloccare "più del 60% delle contaminazioni attraverso delle misure di contenimento per gestire l'epidemia".[33] Le condizioni climatiche non gioverebbero a un'attenuazione della diffusione, contrariamente a quanto si verifica per l'influenza stagionale[34], almeno fino al 2022. Ciò sembra essere confermato anche dalla distribuzione osservata in paesi come l'Iran e l'Australia, che all'inizio dell'anno hanno registrato temperature primaverili per l'emisfero settentrionale.

Il tasso di pazienti infetti ma asintomatici è compreso tra 1 e 50%.[35][36][37] La popolazione giovanile sarebbe per alcuni un vettore di trasmissione perché infetta mentre la popolazione adulta,[38] per altri sarebbe minore,[39] in particolare per i bambini di età inferiore ai 14 anni.[40]

Un protocollo di rilevazione sistematica di epidemie o micro-epidemie, utilizzato nei paesi asiatici (metodo "sorveglianza-contenimento"[41][42]) non è favorito dal ministero della salute francese,[43][44] per mancanza di sufficienti test e centri di rilevamento e per l'incapacità di gestione a causa dell mancanza di mascherine protettive[45], di respiratori[46] dovuto in particolare all'insufficiente produzione nazionale.[47][48] L'esempio del gande contagio avvenuto nella casa di cura di Vill'alizé,[49][50][51][52] mostra il pericolo dovuto al rinvio dei test di screening durante la fase sintomatica malattia (considerando che il periodo medio di incubazione asintomatica è di 6 giorni[53]) e che sarebbe legalmente responsabilità dello Stato, nel quadro del principio di precauzione.[54]. Ad esempio, secondo il New England Journal of Medicine, in uno studio condotto su oltre 1 000 pazienti affetti da coronavirus ricoverati in ospedale in Cina, solo il 43,8% di essi aveva febbre al momento del ricovero.[55]. Inoltre un altro studio indica che i casi asintomatici sono causa del contagio del 79% dei casi rilevati.[56]

Il numero di test effettuati quotidianamente in Francia è molto basso rispetto ad altri paesi: il paese si trova infatti solo in 8ª posizione nella classifica dei paesi per numero di test eseguiti, in base alla popolazione (8 volte inferiore alla Corea con una popolazione di circa 52 milioni).[57][58]

La valutazione della mortalità indotta dal virus (dallo 0,6% al 5% a seconda del paese[59], e con una probabile media dell'1%[60]) sembra essere collegata al tasso di test per abitante effettuati, e in misura minore alla qualità dei trattamenti forniti. Infatti, se i dati relativi ai decessi sono noti e precisi, quelli delle persone infette sono molto approssimativi a causa della grande percentuale di pazienti asintomatici, in particolare se le prescrizioni del test sono riservate ai pazienti sintomatici in stato di difficoltà respiratoria. Il confronto delle curve di contagio per la Corea e altri paesi[61] ci consente di ipotizzare una stima per difetto del numero di casi reali di contagio in Francia[62]. In particolare, il tasso di mortalità risulta dieci volte più alto in Francia che in Germania (le cui capacità di screening sono 6 volte maggiori[63][64] rispetto alla Francia) ed è probabilmente in gran parte legato ad una sottostima del numero di casi reali in Francia.[65][66] Le capacità di rilevazione in Francia sono sostanzialmente limitate[67] dalla fornitura di dispositivi di ciclismo termico di dominio pubblico, disponibili solo nei 120 centri di rilevamento. Inoltre, nonostante il decreto del 7 marzo 2020[68] autorizzi l'apertura di nuovi centri di screening, le aperture effettive sono state poche,[69][70][71] ossia circa 150 in Francia. I centri di screening sono stati aperti quasi esclusivamente negli ospedali, il che aumenta il rischio di malattie nosocomiali[72][73][74] (rispetto ad esempio 540[75][76][77] per la Corea). Il 16 marzo, l'OMS ha sollecitato di testare ogni caso sospetto[78]. Tuttavia, la politica di screening rimane, a metà marzo 2020, disparata a seconda dei paesi[79], mentre la risposta all'epidemia globale non può essere realizzata efficacemente senza un'azione coordinata da parte degli Stati e senza essere gestita da una politica di screening condivisa e capeggiata dai paesi[80][81] che sono riusciti a far abbassare[82] la curva dei casi rilevati. Il 20 marzo, il presidente del consiglio scientifico ha stimato che alla fine del periodo di quarantena sarà necessario uno screening generalizzato[83]. Intanto i dati disponibili a metà marzo 2020 suggeriscono che la progressione dell'epidemia in Francia seguirà, con poca differenza, quella dell'Italia con un ritardo dai 6 ai 9 giorni,[84][85][86] e l'effetto delle misure di contenimento varate in Italia non sta avendo un risonanza efficace.[87][88] La curva della mortalità, tuttavia, dà speranza di stabilizzazione per l'inizio di maggio.[89]

Numero di test per paese[modifica | modifica wikitesto]

Secondo il quotidiano Le Monde, fino al 20 marzo 2020 erano stati effettuati in Germania "160.000 test a settimana" (ovvero 22.857 al giorno),[90] mentre in Francia ne erano stati eseguiti meno di 2.000 fino all'8 marzo e 4.000 a partire dal 13 marzo.

In Inghilterra, secondo The Guardian, fino al 18 marzo 2020[91] erano stati eseguiti 4.000 test al giorno e il governo ha annunciato di voler raggiungere rapidamente i 20.000.

Negli Stati Uniti, come riportato nel New York Times,[92] LabCorp ha annunciato che potrebbe eseguire 10.000 test al giorno a partire dal 23 marzo 2020 e più di 20.000 test al giorno alla fine di marzo; il settore pubblico ha effettuato solo 30.000 test nelle cinque settimane precedenti, secondo i dati della Johns-Hopkins University. Il 24 marzo, il coordinatore del gruppo di lavoro della Casa Bianca sul coronavirus ha annunciato che venivano eseguiti dai 50.000 ai 70.000 test giornalieri.[93]

Note[modifica | modifica wikitesto]

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