Utente:Giuseppe22Perrone/Storia della penicillina

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La struttura centrale della penicillina, dove R è un gruppo variabile
Muffa di Fleming, Penicillium rubens CBS 205.57. A–C. Colonie 7 d old 25 °C. A. CYA. B. MEA. C. YES. D–H. Conidiofori. I. Conidia. Bar = 10 µm.

La storia della penicillina segue un numero di osservazioni e scoperte di prove lampanti riguardo l' attività antibiotica della muffa Penicillium. In seguito all'identificazione del Penicillium rubens come fonte del composto nel 1928 e, con la produzione di composto puro nel 1942, la penicillina divenne il primo antibiotico di derivazione naturale. Ci sono aneddoti su antiche società che utilizzano muffe per trattare le infezioni e, nei secoli successivi, molte persone hanno osservato l'inibizione della crescita batterica da varie muffe.[1] Tuttavia, rimane ancora un'incognita se le specie in questione fossero appartenenti al genere dei Penicillium e se le sostanze antimicrobiche prodotte fossero penicillina.

Mentre lavorava all'ospedale Saint Mary di Londra, il medico scozzese Alexander Fleming fu il primo a scoprire in maniera del tutto sperimentale che una muffa di Penicillium secerne una sostanza antibatterica ,e, il primo a concentrarne la sostanza attiva coinvolta, da lui denominata penicillina nel 1928.[2][3] La muffa fu stabilita essere una variante rara di Penicillium notatum (ora Penicillium rubens), un contaminante di laboratorio nel suo studio.[4] Per i successivi 16 anni, egli ha mirato verso migliori metodi di produzione di penicillina, d'uso dei medicinali e di sperimentazione clinica. L'esito positivo del trattamento di Harry Lambert , che aveva contratto una meningite streptococcica fatale nel 1942 , si rivelò essere un punto di svolta nell'uso medico della penicillina.

In seguito, molti scienziati furono coinvolti nella stabilizzazione e produzione di massa di penicillina ,e , nella ricerca di ceppi più produttivi di Penicillium.[5] Contributi importanti furono quelli di Ernst Chain, Howard Florey, Norman Heatley and Edward Abraham.[2] Fleming, Florey e Chain condivisero nel 1945 il Premio Nobel per la medicina per la scoperta e sviluppo della penicillina.[6] Nel 1964, Dorothy Hodgkin ricevette il Premio Nobel per la chimica,individuando le strutture di importanti sostanze biochimiche, inclusa la penicillina. Poco dopo la scoperta della penicillina, ci furono rapporti di resistenza ad essa in molti batteri. La ricerca che mira ad aggirare e comprendere i meccanismi della resistenza antibiotica continua tutt'ora.[7][8]

Storia antica[modifica | modifica wikitesto]

Molte culture antiche, comprese quelle in Egitto, Grecia e India, scoprirono indipendentemente le proprietà utili di funghi e piante nel trattamento delle infezioni.[9] Questi trattamenti spesso hanno funzionato perché molti organismi, incluse molte specie di muffe, producono naturalmente sostanze antibiotiche. Tuttavia, gli antichi praticanti non potevano identificare o isolare con precisione i componenti attivi in questi organismi.

Nella Polonia del XVII secolo, il pane bagnato era mescolato con ragnatele (che spesso contenevano spore fungine) per curare le ferite. La tecnica è stata menzionata da Henryk Sienkiewicz nel suo libro del 1884 With Fire and Sword. In Inghilterra nel 1640, l'idea di utilizzare la muffa come forma di trattamento medico fu registrata da speziali del calibro di John Parkinson, Re dell'erbario, che sostenne l'uso della muffa nel suo libro di farmacologia.[10]

Prime prove scientifiche[modifica | modifica wikitesto]

Nelle prime fasi della ricerca sulla penicillina, la maggior parte delle specie di Penicillium veniva generalmente chiamata Penicillium glaucum, quindi non possiamo identificare i ceppi effettivamente utilizzati. Pertanto, è difficile dire se fosse davvero la penicillina a impedire la crescita batterica.[11]

La storia moderna della ricerca sulla penicillina inizia seriamente negli anni '70 dell'Ottocento nel Regno Unito. Sir John Scott Burdon-Sanderson, che cominciò la sua carriera lavorativa presso l'ospedale di Saint Mary (1852–1858) dove successivamente potè insegnare (1854–1862), osservò che il fluido di coltura ricoperto di muffa non avrebbe prodotto crescita batterica. La scoperta di Burdon-Sanderson spinse Joseph Lister, un chirurgo inglese e padre della moderna antisepsi, a scoprire nel 1871 che anche i campioni di urina contaminati da muffe non permettevano la crescita di batteri. Lister descrisse anche l'azione antibatterica sul tessuto umano di una specie di muffa che chiamò Penicillium glaucum .[12] Ad un infermiere del King's College Hospital, le cui ferite non reagivano ad alcun antisettico tradizionale, fu somministrata un'altra sostanza che lo guarì ,e, il cancelliere di Lister lo informò che si chiamava Penicillium . Nel 1874, il medico gallese William Roberts, che in seguito coniò il termine " enzima ", osservò che la contaminazione batterica è generalmente assente nelle colture di laboratorio di Penicillium glaucum. John Tyndall proseguì il lavoro di Burdon-Sanderson e dimostrò alla Royal Society nel 1875 l'azione antibatterica del fungo Penicillium. [13]

All'epoca, il Bacillus anthracis era stato dimostrato esser causa dell' antrace e, fu la prima dimostrazione che un batterio specifico causava una malattia specifica. Nel 1877, i biologi francesi Louis Pasteur e Jules Francois Joubert osservarono che le colture dei bacilli dell'antrace, se contaminate da muffe, potevano essere inibite con successo. Alcune testimonianze dicono che Pasteur identificò il ceppo come Penicillium notatum . Tuttavia, nel saggio ''Microbe Hunters'' pubblicato nel 1926 , Paul de Kruif descrisse questo incidente come contaminazione da parte di altri batteri piuttosto che da muffe.[14] Nel 1887, Garré trovò risultati simili. Nel 1895 Vincenzo Tiberio, medico italiano dell' Università di Napoli, pubblicò una ricerca sulle muffe inizialmente trovate in un pozzo d'acqua ad Arzano ; dalle sue osservazioni, concluse che queste muffe contenevano sostanze solubili ad azione antibatterica.[15][16][17][18]

Due anni dopo, Ernest Duchesne , all'École du Service de Santé Militaire di Lione, scoprì in modo indipendente le proprietà curative di una muffa di Penicillium glaucum, curando addirittura porcellini d'india infetti di tifo . Pubblicò una dissertazione [19][20][21] nel 1897 , ma fu ignorata dall' Istituto Pasteur . Duchesne stesso stava usando una scoperta fatta in precedenza da garzoni di stalla arabi, che usavano muffe per curare le piaghe sui cavalli. Egli non affermò che la muffa contenesse alcuna sostanza antibatterica, ma solo che essa in qualche modo proteggesse gli animali. La penicillina isolata da Fleming non cura il tifo e quindi non si sa quale sostanza possa essere stata responsabile della cura di Duchesne.[N 1] Uno scienziato dell'Istituto Pasteur, il costaricano Clodomiro Picado Twight, rilevò in modo simile l'effetto antibiotico del Penicillium nel 1923.

Andre Gratia e Sara Dath nella Libera Università di Bruxelles, in Belgio, stavano studiando gli effetti dei campioni di muffa sui batteri. Nel 1924 scoprirono che le colture morte di Staphylococcus aureus erano contaminate da una muffa, uno streptomicete . Dopo ulteriori esperimenti, dimostrarono che l'estratto di muffa potesse uccidere non solo S. aureus, ma anche Pseudomonas aeruginosa, Mycobacterium tuberculosis ed Escherichia coli .[22] Gratia chiamò l'agente antibatterico "micolisato" (muffa assassina). L'anno successivo trovarono un'altra muffa assassina che potesse inibire il batterio dell'antrace ( B. anthracis ). Segnalando nel Comptes Rendus Des Séances de La Société de Biologie et de Ses Filiales la muffa come Penicillium glaucum .[23] Ma questi risultati ricevettero poca attenzione poiché l'agente antibatterico e il suo valore medico non furono completamente compresi; inoltre, i campioni di Gratia andarono perduti.

La scoperta rivoluzionaria[modifica | modifica wikitesto]

Sfondo[modifica | modifica wikitesto]

Alexander Fleming nel suo Ospedale di Saint Mary a Londra

La penicillina fu scoperta dal medico scozzese Alexander Fleming nel 1928. Mentre lavorava nell'Ospedale di Saint Mary Fleming stava studiando il modello di variazione in S. aureus.[24] Fu ispirato dalla scoperta del medico irlandese Joseph Warwick Bigger e dei suoi due studenti C.R. Boland e R.A.Q. O'Meara al Trinity College, Dublino, Irlanda, nel 1927. Bigger e i suoi studenti scoprirono che quando hanno coltivato un particolare ceppo di S. aureus, designato con "Y" e isolato un anno prima da un pus di ascesso ascellare da un individuo, il batterio crebbe in una varietà di ceppi. Pubblicarono la loro scoperta con il titolo “Variant colonies of Staphylococcus aureus” nel periodico The Journal of Pathology and Bacteriology, concludendo:

Siamo rimasti sorpresi e piuttosto scossi di trovare, su un certo numero di piastre, vari tipi di colonie che differivano completamente dalla tipica colonia di aureus. Alcuni di questi erano piuttosto bianchi; alcuni, o bianchi o del colore usuale, erano ruvidi sulla superficie e con margini crenati.[25]

Fleming e il suo ricercatore Daniel Merlin Pryce seguirono questo esperimento, ma Pryce fu trasferito in un altro laboratorio all'inizio del 1928. Dopo alcuni mesi di lavoro da solo, un nuovo studioso, Stuart Craddock, si unì a Fleming. Il loro esperimento ebbe successo e Fleming progettò e accettò di scrivere un rapporto chiamato A System of Bacteriology che sarebbe stato pubblicato dal Medical Research Council entro la fine del 1928.[24]

Scoperta iniziale[modifica | modifica wikitesto]

In agosto, Fleming trascorse una vacanza con la sua famiglia nella sua casa di campagna The Dhoon a Barton Mills, Suffolk. Prima di lasciare il suo laboratorio, inoculò diverse piastre di coltura con S. aureus. Tenne i piatti da parte su un angolo del tavolo, lontano dalla luce solare diretta e per fare spazio a Craddock, al fine di lavorare in sua assenza. Durante una vacanza, il 1 ° settembre 1928 fu nominato professore di batteriologia presso la St Mary's Hospital Medical School. Arrivò al suo laboratorio il 3 settembre, dove Pryce lo stava aspettando per salutarlo.[26] Mentre lui e Pryce esaminavano le piastre di coltura, ne trovarono una con il coperchio aperto e la coltura contaminata da una muffa blu-verde. Nella placca contaminata i batteri attorno alla muffa non erano cresciuti, mentre quelli più lontani crebbero normalmente, il che significa che la muffa uccise i batteri.[27] Fleming commentò mentre guardava il piatto: "È divertente".[28] Pryce fece notare a Fleming: "È così che hai scoperto il Lisozima."[29]

Esperimento[modifica | modifica wikitesto]

L'Ospedale di Saint Mary mostra il laboratorio di Fleming e Praed Street

Fleming partì per riprendere la sua vacanza e tornò per gli esperimenti alla fine di settembre.[24] Dopo quattro giorni scoprì che le piastre sviluppavano grandi colonie di muffa. Ripeté l'esperimento con gli stessi risultati di uccisione dei batteri. Poi raccontò la sua esperienza:

Quando mi sono svegliato subito dopo l'alba del 28 settembre 1928, di certo non avevo intenzione di rivoluzionare tutta la medicina scoprendo il primo antibiotico al mondo, o batteriomicida del mondo. Ma suppongo che sia stato esattamente quello che ho fatto.[30]

Concluse che la muffa stava rilasciando una sostanza che inibiva la crescita batterica e che aveva prodotto il brodo di coltura della muffa e successivamente concentrò la componente antibatterica.[31] Dopo aver testato diversi batteri, scoprì che la muffa poteva uccidere solo batteri specifici. Ad esempio, Staphylococcus,Streptococcus, e diphtheria bacillus (Corynebacterium diphtheriae) furono facilmente uccisi; ma non ci fu alcun effetto sul batterio tifoide (Salmonella typhimurium) e sul bacillo influenzale (Haemophilus influenzae). Preparò un metodo di coltura di grandi dimensioni da cui poté ottenere grandi quantità di succo di muffa. Chiamò questo succo "penicillina", per evitare la ripetizione della frase piuttosto ingombrante 'Muffa filtrata del brodo.'[32] Inventò il nome il 7 marzo 1929.[26] In seguito (nella sua conferenza per il Nobel) diede un'ulteriore spiegazione, dicendo:

Mi è stato spesso chiesto perché ho inventato il nome "Penicillina". Ho semplicemente seguito linee perfettamente ortodosse e ho coniato una parola che spiegava che la sostanza penicillina era derivata da una pianta del genere Penicillium proprio come molti anni fa è stata inventata la parola "Digossina" per una sostanza derivata dalla pianta Digitalis.[33]

Fleming non aveva una formazione in chimica, quindi lasciò tutti i lavori chimici a Craddock – una volta osservò: "Sono un batteriologo, non un chimico."[24] Nel gennaio 1929 reclutò Frederick Ridley, il suo ex ricercatore che aveva studiato biochimica, specificamente per studiare le proprietà chimiche della muffa.[28] Ma non potevano isolare la penicillina e prima che gli esperimenti fossero finiti, Craddock e Ridley lasciarono entrambi Fleming per altri lavori.[26] Fu a causa del loro fallimento nell'isolare il composto che Fleming praticamente abbandonò ulteriori ricerche sugli aspetti chimici della penicillina[34] sebbene eseguì test biologici fino al 1939.

Identificazione della muffa[modifica | modifica wikitesto]

Penicillium rubens (Tipo nomenclaturale)

Dopo il confronto strutturale con diverse specie di Penicillium, Fleming inizialmente credeva che il suo esemplare fosse Penicillium chrysogenum, una specie descritta da un microbiologo americano Charles Thomas nel 1910. Fu fortunato come Charles John Patrick La Touche, un botanico irlandese, che si era appena unito come micologo al Santa Maria per indagare sui funghi come causa dell'asma. La Touche ha identificato l'esemplare come Penicillium rubrum,[35][36] identificazione usata da Fleming nella sua pubblicazione.

Nel 1931, Thom ha riesaminato un diverso Penicillium compreso quello dell'esemplare Fleming . Giunse ad una conclusione confusionaria , affermando, "Ad. 35 [Il Campione di Fleming ] è P. notatum WESTLING. Questo è un membro della serie P. chrysogenum con conidi più piccoli di P. chrysogenum stesso."[37] P. notatum è stato descritto dal chimico svedese Richard Westling nel 1811. Da quel momento in poi, la muffa di Fleming fu sinonimo di P. notatum e P. chrysogenum.. Ma Thom adottò e rese popolare l'uso di P. chrysogenum.[38] Oltre a P. notatum, nuove specie furono scoperte come P. meleagrinum e P. cyaneofulvum sono state riconosciute come membri di P. chrysogenum nel 1977.[39] Per risolvere la confusione, il diciassettesimo congresso internazionale botanico tenutosi a Vienna, in Austria, nel 2005 ha adottato formalmente il nome P. chrysogenum come Nomen conservandum .[40] L'intera sequenza genomica e l'analisi filogenetica nel 2011 hanno rivelato che la muffa di Fleming appartiene a P.rubens una specie descritta dal microbiologo belga Philibert Biourge nel 1923, e che P. chrysogenum è una specie diversa.[4][41]

La fonte della contaminazione fungina nell'esperimento di Fleming è rimasta una speculazione per diversi decenni. Lo stesso Fleming suggerì nel 1945 che le spore fungine entravano dalla finestra di fronte a Pread Street.Questa storia è stata considerata come un fatto ed è stata resa popolare nella letteratura,[42] a partire dal libro di George Lacken del 1945 The Story of Penicillin.[26] Ma fu successivamente contestato dai suoi colleghi, tra cui Pryce, che testimoniò molto più tardi che la finestra del laboratorio di Fleming era tenuta chiusa tutto il tempo.[43] Ronald Hare concordò anche nel 1970 che la finestra era più spesso bloccata perché era difficile da raggiungere a causa di un grande tavolo con apparati posizionati di fronte ad essa. La Touche disse a Hare di aver dato a Fleming 13 esemplari di funghi (10 dal suo laboratorio) e solo uno del suo laboratorio mostrava un'attività antibatterica simile alla penicillina. Fu da questo punto che fu raggiunto un consenso sul fatto che la muffa di Fleming provenisse dal laboratorio di La Touche, che era un piano inferiore dell'edificio, con le spore trasportate nell'aria attraverso le porte aperte.[44]

Ricezione e pubblicazione[modifica | modifica wikitesto]

La scoperta di Fleming non fu considerata inizialmente come una scoperta importante. Anche se ha mostrato le sue tavole di cultura ai suoi colleghi, tutto ciò che ha ricevuto è stata una risposta indifferente. Egli ha descritto la scoperta il 13 febbraio 1929 davanti al Medical Research Club.La sua presentazione dal titolo "Un mezzo per l'isolamento del Pfeiffer's bacillus" non ha ricevuto particolare attenzione.[24]

Nel 1929, Fleming riportò le sue scoperte al British Journal of Experimental Pathology il 10 maggio 1929, e fu pubblicato nel numero del mese successivo.[45][8] Non ha attirato alcuna attenzione seria. Lo stesso Fleming era piuttosto insicuro dell'applicazione medica ed era più preoccupato per la domanda di isolamento batterico, poiché concludeva:

Oltre al suo possibile uso nel trattamento di infezioni batteriche penicillina è certamente utile per il batteriologo per il suo potere di inibire i microbi indesiderati in colture batteriche in modo che i batteri insensibili penicillina possono essere facilmente isolati.[45]

G.E. Breen, membro del Chelsea Arts Club, una volta chiese a Fleming: "Volevo solo che mi dicessi se pensi che sarà mai possibile fare un uso pratico della roba [penicillina]. Per esempio, potrei usarlo?" Fleming guardò vuoto per un momento e poi rispose: "Non lo so. È troppo instabile. Dovrà essere purificato, e non posso farlo da solo."[24] Anche nel 1941, il British Medical Journal riportò che "i fatti principali emersi da uno studio molto completo [della penicillina] in cui è coinvolta una grande squadra di lavoratori... non sembrano essere stati considerati utili da nessun altro punto di vista." [46][47][N 2]

Isolamento[modifica | modifica wikitesto]

Nel 1939, Boris Chain,un chimico tedesco (poi naturalizzato britannico), si unì alla Sir William Dunn School of Pathology presso l'Università di Oxford per indagare sugli antibiotici. Fu immediatamente impressionato dal documento di Fleming del 1929 e informò il suo supervisore uno scienziato australiano Florey (poi barone Florey) del potenziale farmaco.[48] All'epoca Florey aveva acquisito una borsa di studio di 25.000 dollari dalla Fondazione Rockefeller per lo studio degli antibiotici.[49] Ha messo insieme una squadra di ricerca tra cui Edward Abraham, Arthur Duncan Gardner, Norman Heatley, Margaret Jennings, J. Orr-Ewing and G. Sanders in addition to Chain[50][51]

Il team di Oxford ha preparato un estratto concentrato di P. rubens come "una polvere marrone " che "è stata ottenuta ed è liberamente solubile in acqua".[52] Hanno scoperto che la polvere era efficace non solo in vitro contro le colture batteriche, ma anche in vivo contro l'infezione batterica nei topi. Il 5 maggio 1939, iniettarono ad un gruppo di otto topi un ceppo virulento di S. aureus e iniettarono a quattro di loro con la soluzione di penicillina. Dopo un giorno, tutti i topi non trattati sono morti mentre i topi trattati con penicillina sono sopravvissuti. Chain lo definì come "un miracolo".[48] Pubblicarono le loro scoperte su The Lancet nel 1940.

Il team riportò i dettagli del metodo di isolamento nel 1941 con uno schema per l'estrazione su larga scala. Hanno anche scoperto che la [penicillina] era più abbondante come concentrato giallo dall'estratto di muffa.[53] Ma erano in grado di produrre solo piccole quantità. All'inizio del 1942, potevano preparare un composto altamente purificato,[54] e lavorare la formula chimica come a C24H32O10N2Ba.[55] Verso la metà del 1942, Chain, Abraham e E.R. Holiday riportarono la produzione del composto puro.[56]

Primo utilizzo medico[modifica | modifica wikitesto]

Fleming ha eseguito la prima sperimentazione clinica con penicillina su Craddock. Craddock aveva sviluppato una grave infezione dell' antro nasale Sinusite e aveva subito un intervento chirurgico. Fleming utilizzò l'apertura chirurgica del passaggio nasale e iniziò ad iniettare penicillina il 9 gennaio 1929, ma senza alcun effetto. Probabilmente era dovuto al fatto che l'infezione era da bacillo influenzale (Haemophilus influenzae), il batterio che aveva trovato insostenibile per la penicillina.[57] Fleming ha dato alcuni dei suoi campioni di penicillina originali al suo collega-chirurgo Arthur Dickson Wright per il test clinico nel 1928.[58][59] Anche se Wright avrebbe detto che "sembrava funzionare in modo soddisfacente,"[60] non ci sono registrazioni del suo uso specifico.

Cecil George Paine, un patologo della Royal Infirmary di Sheffield, è stato il primo a utilizzare con successo la penicillina per le cure mediche.[61] Era un ex allievo di Fleming e quando seppe della scoperta, chiese il campione di penicillina da Fleming.[62] Inizialmente tentò di trattare la sicosi (eruzioni nei follicoli della barba) con la penicillina, ma senza successo, probabilmente perché il farmaco non penetrava abbastanza in profondità. Passando all'ophthalmia neonatorum, un'infezione gonococcica nei neonati, ha ottenuto la prima cura il 25 novembre 1930, quattro pazienti (un adulto , e altri bambini ) con infezioni oculari.[63][64]

Il team di Florey a Oxford ha dimostrato che l'estratto di Penicillium ha ucciso diversi batteri (Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus, e Clostridium septique) in coltura e ha curato efficacemente l'infezione da Streptococcus nei topi.[48] Hanno riportato nel numero del 24 agosto 1940 di The Lancet la "Penicillina come agente chemioterapico" arrivando ad una conclusione:

I risultati sono chiari e mostrano che la penicillina è attiva in vivo contro almeno tre degli organismi inibiti in vitro. Sembrerebbe ragionevole sperare che tutti gli organismi ad alta diluizione in vitro siano trattati in vivo. La penicillina non sembra essere correlata ad alcuna sostanza chemioterapica attualmente in uso ed è particolarmente notevole per la sua attività contro gli organismi anaerobici associati alla gangrena gassosa.[52]

Nel 1941, la squadra di Oxford curò un poliziotto, Albert Alexander con una grave infezione al volto; le sue condizioni migliorarono, ma poi le scorte di penicillina finirono e lui morì. Successivamente, molti altri pazienti sono stati trattati con successo.[65] Nel dicembre 1942, i sopravvissuti all'incendio di Cocoanut Grove a Boston furono i primi pazienti ustionati ad essere trattati con penicillina.[66]

Il test clinico più importante fu nell'agosto 1942 quando Fleming guarì Harry Lambert da un'infezione mortale del sistema nervoso (meningite streptococcica). streptococcal meningitis . Lambert era un collaboratore di Robert, il fratello di Fleming, che aveva richiesto Fleming per le cure mediche.[67] Fleming ha chiesto a Florey il campione purificato di penicillina, che Fleming ha immediatamente utilizzato per iniettare nel canale spinale di Lambert. Lambert mostrò segni di miglioramento il giorno successivo,[68] e si riprese completamente entro una settimana .[69][70] Fleming ha riportato il suo studio clinico su The Lancet nel 1943.[71] Fu su queste prove mediche che il Gabinetto di Guerra britannico istituì il Comitato della Penicillina il 5 aprile 1943. Il comitato era composto da Cecil Weir, Direttore Generale delle Attrezzature, come Presidente, Fleming, Florey, Sir Percival Hartley, Allison e rappresentanti di aziende farmaceutiche come membri. Ciò ha portato alla produzione di massa di penicillina entro l'anno successivo.[72][73]

Produzione di Massa[modifica | modifica wikitesto]

Sapendo che la produzione su larga scala per uso medico era inutile in un laboratorio confinato, il team di Oxford cercò di convincere il governo britannico e le aziende private devastate dalla guerra per la produzione di massa, ma invano[74] Florey e Heatley si recarono negli Stati Uniti nel giugno 1941 per persuadere il governo e le aziende farmaceutiche statunitensi.[75] Sapendo che tenere il campione di muffa in fiale poteva essere facilmente perso, hanno invece spalmato le loro tasche del cappotto con la muffa.[48] Sono arrivati a Washington D.C. all'inizio di luglio per discutere con Ross Granville Harrison , presidente National Research Council (NRC), e Charles Thom e Percy Wells del Dipartimento dell'Agricoltura degli Stati Uniti. Sono stati diretti per avvicinarsi al laboratorio di ricerca regionale del Nord dell'USDA (NRRL, ora il centro nazionale per la ricerca agricola) dove sono state fatte fermentazioni su larga scala.[76] Raggiunsero Peoria, Illinois, il 14 luglio per incontrare Andrew Jackson Moyer e Robert D. Coghill at the NRRL. Gli americani lavorarono rapidamente sulla muffa e furono in grado di fare cultura entro la fine di luglio. Ma si sono resi conto che la muffa di Fleming non era abbastanza efficiente da produrre grandi quantità di penicillina.

Il micologo dell' NRR Kenneth Bryan Raper ha ottenuto l'aiuto del Comando dei Trasporti dell'Esercito degli Stati Uniti per cercare muffe simili in diverse parti del mondo e gli stampi migliori sono stati quelli di Chungkin (Cina), Bombay (Mumbai, India) e Città del Capo (Sud Africa). Ma il campione migliore era quello del melone (un tipo di melone) venduto al mercato della frutta di Peoria nel 1943. La muffa è stata identificata come P. chrysogenum e designato come NRRL 1951 o ceppo di melone.[76] C'è una storia popolare secondo cui Mary K. Hunt (o Mary Hunt Stevens[77]), un membro del personale di Raper, ha raccolto la muffa;[78] per il quale era stata pubblicizzata come "Mouldy Mary".[79][80] Ma Raper ha osservato questa storia come un "folclore" e che il frutto è stato consegnato in laboratorio da una donna del mercato della frutta di Peoria.

Tra il 1941 e il 1943, Moyer, Coghill e Kenneth Raper svilupparono metodi per la produzione industrializzata di penicillina e isolarono ceppi più resistenti del fungo Penicillium.[81] La ricerca simultanea di Jasper H. Kane e di altri scienziati della Pfizer a Brooklyn ha sviluppato il metodo pratico di fermentazione in vasca profonda per la produzione di grandi quantità di penicillina di grado farmaceutico.[82]

Annuncio di penicillina per i militari della seconda guerra mondiale, c . 1944

Quando iniziò la produzione, i contenitori da un litro avevano una resa inferiore all'1%, ma migliorarono fino ad un rendimento dell'80-90% in contenitori da 10.000 galloni. Questo aumento di efficienza avvenne tra il 1939 e il 1945 come risultato di una continua innovazione di processo. Orvill May, il direttore del Agricultural Research Service il Servizio di Ricerca Agricola, aveva Robert Coghill, che era il capo della divisione fermentazione, utilizzare la sua esperienza con la fermentazione per aumentare l'efficienza di estrazione della penicillina dalla muffa. Poco dopo l'inizio, Moyer ha sostituito il saccarosio con il lattosio nei mezzi di crescita, il che ha comportato un aumento della resa. Un aumento ancora maggiore si è verificato quando Moyer ha aggiunto il liquore di mais.[75]

Un problema principale con il processo che gli scienziati hanno affrontato è stata l'inefficienza di far crescere la muffa sulla superficie dei loro bagni nutrienti, piuttosto che farla immergere. Anche se un processo sommerso di crescita della muffa sarebbe più efficiente, la varietà utilizzata non era adatta alle condizioni che avrebbe richiesto. Questo portò la NRRL alla ricerca di una varietà che era già stata adattata al lavoro, e una fu trovata in un melone ammuffito acquistato da un mercato agricolo di Peoria.[83] Per migliorare tale sforzo, i ricercatori l'hanno sottoposto ai raggi X per facilitare le mutazioni nel suo genoma e sono riusciti ad aumentare ulteriormente le capacità di produzione.[84]

Ora che gli scienziati avevano una muffa che cresceva bene sommersa e produceva una quantità accettabile di penicillina, la sfida successiva era fornire l'aria necessaria alla muffa per farla crescere. Questo è stato risolto utilizzando un aeratore, ma l'aerazione ha causato una forte schiumosità a causa del mais ripido. Il problema della schiumosità è stato risolto con l'introduzione di un agente antischiuma noto come gliceril monoricinoleato.[84]

Analisi chimica[modifica | modifica wikitesto]

La struttura chimica della penicillina fu proposta per la prima volta da Edward Abraham nel 1942.[85] Dorothy Hodgkin ha determinato la corretta struttura chimica della penicillina utilizzando la cristallografia a raggi X a Oxford nel 1945.[86][87][88][7] Nel 1945, il Comitato statunitense per la ricerca medica e il British Medical Research Council pubblicarono congiuntamente su Science un'analisi chimica condotta in diverse università, aziende farmaceutiche e dipartimenti di ricerca governativi. Il rapporto ha annunciato l'esistenza di diverse forme di composti di penicillina che condividevano tutti lo stesso componente strutturale chiamato β-lattame.[89] Alle penicilline sono stati dati vari nomi come l'utilizzo di numeri romani nel Regno Unito (come la penicillina I, II, III) per le loro scoperte e lettere (come F, G, K e X) che si riferiscono alle loro origini o fonti, come di seguito :

Nomenclatura del Regno Unito Nomenclatura statunitense Nome chimico
Penicillina I Penicillina F 2-pentenilpenicillina
Penicillina II Penicillina G Benzilpenicillina
Penicillina III Penicillina X p -idrossibenzilpenicillina
Penicillina IV Penicillina K n- Eptilpenicillina

I nomi chimici erano basati sulle Catene laterali dei composti. Per evitare i nomi controversi, Chain introdusse nel 1948 i nomi chimici come nomenclatura standard, notando come: "Per rendere la nomenclatura il più possibile univoca, si è deciso di sostituire il sistema dei numeri o delle lettere con prefissi indicanti la natura chimica della catena laterale R."[90]

A Kundl, Tirolo, Austria, nel 1952, Hans Margreiter ed Ernst Brandl di Biochemie (ora Sandoz ) svilupparono la prima penicillina stabile agli acidi per somministrazione orale, la penicillina V. [91] Il chimico americano John C. Sheehan del Massachusetts Institute of Technology (MIT) ha completato la prima sintesi chimica della penicillina nel 1957.[92][93][94] Sheehan aveva iniziato i suoi studi sulla sintesi della penicillina nel 1948 e durante queste indagini sviluppò nuovi metodi per la sintesi dei peptidi, così come nuovi gruppi protettivi, gruppi che mascherano la reattività di alcuni gruppi funzionali.[95] Sebbene la sintesi iniziale sviluppata da Sheehan non fosse appropriata per la produzione di massa di penicilline, uno dei composti intermedi nella sintesi di Sheehan era l'acido 6-aminopenicillanico (6-APA), il nucleo della penicillina.[96][97]

Uno sviluppo importante fu la scoperta della 6-APA stessa. Nel 1957, i ricercatori dei Beecham Research Laboratories (ora Beechem Group) nel Surrey isolarono 6-APA dai mezzi di coltura di P. chrysogenum. 6-APA è stato trovato per costituire il nucleo 'nucleo' della penicillina (in effetti, tutti gli antibiotici β-lattami) ed è stato facilmente modificato chimicamente attaccando catene laterali attraverso reazioni chimiche .[98][99] La scoperta è stata pubblicata nel Nature nel 1959).[100] Questo ha aperto la strada a nuovi e migliori farmaci come tutte le penicilline semi-sintetiche sono prodotte da manipolazione chimica di 6-APA.[101]

La meticillina antibiotica β-lattamica di seconda generazione , progettata per contrastare le penicilline resistenti di prima generazione, è stata introdotta nel Regno Unito nel 1959. Forme resistenti alla meticillina di Staphylococcus aureus probabilmente esistevano già all'epoca.[7][102]

Risultati[modifica | modifica wikitesto]

Fleming, Florey e Chain condividono equamente Premio Nobel per la medicina del 1945 "per la scoperta della penicillina e i suoi effetti curativi contro varie malattie infettive."[6]

I metodi per la produzione e l'isolamento della penicillina furono brevettati da Andrew Jackson Moyer negli Stati Uniti d'America nel1945.[103][104][105] Chain volle depositare un brevetto, Florey e i suoi compagni obiettarono sostenendo che sarebbe stato un beneficio per tutti.[48] Sir Henry Dale suggerì specificatamente che ciò sarebbe stato un atto non etico.[65] Quando Fleming venne a sapere dei brevetti americani sulla produzione di penicillina, si infuriò e commentò:

Io ho scoperto la penicillina e l'ho concessa liberamente a beneficio di tutta l'umanità. Per quale ragione questa dovrebbe diventare un monopolio fonte di profitto per produttori di altri Paesi?[68]

Dorothy Hodgkin vinse il Premio Nobel per la chimica nel 1964 "per le sue determinazione con tecniche a raggi X delle strutture di importanti sostanze biochimiche."

Sviluppi dei derivati della penicillina[modifica | modifica wikitesto]

Il campo ristretto delle malattie curabili, o "spettro di attività" delle penicilline, insieme alla povera attività della fenossimetilpenicillina attiva oralmente, spinse alla ricerca di derivati della penicillina in grado di curare un campo più ampio di infezioni. L'isolamento del 6-APA, il nucleo della penicillina, permise la preparazione di penicilline semisintetiche, con vari miglioramenti sulla Benzilpenicillina (biodisponibilità, spettro, stabilità, tolleranza). Il primo miglioramento importante fu la Ampicillina nel 1961. Essa fu prodotta dai Laboratori di Ricerca di Beecham a Londra.[106] Era più vantaggiosa rispetto alla penicillina originale in quanto offriva uno spettro più ampio di attività contro batteri Gram-positivi e Gram-negativi. Sviluppi successivi produssero penicilline resistenti alla β-lattamasi, incluse Flucloxacillina, Dicloxacillina, and Meticillina. Queste erano importanti per la loro attività contro le specie batteriche produttrici di β-lattamasi, ma erano inefficaci contro i ceppi di Straphylococcus aureus resistente alla meticillina (MRSA) che emersero successivamente[107]

Un altro sviluppo della linea delle vere penicilline furono le penicilline antipseudomonali, come la Carbenicillina, Ticarcillina, e la Piperacillina, utili per la loro attività contro i Batteri Gram-negativi. Comunque, l'utilità dell'anello β-lattamico fu tale che antibiotici collegati, inclusi Mecillinami, the Carbapenemi e, soprattutto, le Cefalosporine, lo mantengono ancora al centro delle loro strutture.[99][108]

Resistenza ai medicinali[modifica | modifica wikitesto]

Fleming segnalò la possibilità della resistenza alla penicillina in condizioni cliniche nella sua conferenza per il Nobel e disse:

Arriverà il tempo in cui sarà possibile comprare la penicillina da tutti nei negozi. Poi ci sarà il pericolo per cui l'ignorante potrebbe facilmente abusarne e, esponendo i propri microbi a quantità non letali di medicinale, renderli resistenti.[109]

Nel 1940, Ernst Chain ed Edward Abraham resero note le prime indicazioni di resistenza degli antibiotici alla penicillina, un ceppo di Escherichia coli che produsse l'enzima Beta-lattamasi, capace di distruggere la penicillina e vanificare completamente il suo effetto antibatterico.[7][8][110] Chain e Abraham elaborarono la natura della penicillinasi che loro riportarono in Nature come:

La conclusione che la sostanza attiva sia un enzima è rappresentata dal fatto che essa è distrutta riscaldandola a 90° per 5 minuti e dall'incubazione con Papaina attivata con potassiocianato a pH6, e che non è dializzabile attraverso membrane di 'Cellophane'.[111]

Nel 1942, è stato documentato che ceppi di Staphylococcus aureus hanno sviluppato una forte resistenza alla penicillina. La maggior parte dei ceppi erano resistenti alla penicillina dagli anni '60 del '900.[112] Nel 1967, fu anche provato che lo Streptococcus pneumoniae è resistente alla penicillina. Molti ceppi hanno sviluppato a volte una resistenza alla penicillina.

Note[modifica | modifica wikitesto]

Esplicative[modifica | modifica wikitesto]

  1. ^ A quel tempo, il termine Penicillium glaucum era usato come una frase generica per una varietà di funghi diversi, sebbene non per Penicillium notatum. La muffa specifica di Duchesne purtroppo non è stata preservata, il che rende oggi impossibile essere certi di quale fungo possa essere stato responsabile della cura e, di conseguenza, ancor meno di quale specifica sostanza antibatterica fosse responsabile.
  2. ^ The statement "does not appear to have been considered as possibly useful from any other point of view" seems to be later deleted, but is still apparent from Fleming's response (BMJ, 2 (4210): 386–386).

Riferimenti[modifica | modifica wikitesto]

  1. ^ Science History Institute, https://www.sciencehistory.org/historical-profile/alexander-fleming. URL consultato il 21 August 2018.
  2. ^ a b acs.org, https://www.acs.org/content/acs/en/education/whatischemistry/landmarks/flemingpenicillin.html. URL consultato il 21 August 2018.
  3. ^ Gwyn Macfarlane, Alexander Fleming : the man and the myth, Cambridge, Mass., Harvard University Press, 1984, ISBN 978-0-19-281884-3, OCLC 11519742.
  4. ^ a b Fleming's penicillin producing strain is not Penicillium chrysogenum but P. rubens, in IMA Fungus, vol. 2, n. 1, June 2011, pp. 87–95, DOI:10.5598/imafungus.2011.02.01.12, PMID 22679592.
  5. ^ Proteomics shows new faces for the old penicillin producer Penicillium chrysogenum, in Journal of Biomedicine & Biotechnology, vol. 2012, 2012, p. 105109, DOI:10.1155/2012/105109, PMID 22318718.
  6. ^ a b (EN) NobelPrize.org, https://www.nobelprize.org/prizes/medicine/1945/summary/. URL consultato il 26 luglio 2020.
  7. ^ a b c d Origins and evolution of antibiotic resistance, in Microbiology and Molecular Biology Reviews, vol. 74, n. 3, September 2010, pp. 417–33, DOI:10.1128/MMBR.00016-10, PMID 20805405.
  8. ^ a b c Penicillin's Discovery and Antibiotic Resistance: Lessons for the Future?, in The Yale Journal of Biology and Medicine, vol. 90, n. 1, March 2017, pp. 135–145, PMID 28356901.
  9. ^ experiment-resources.com, http://www.experiment-resources.com/history-of-antibiotics.html. URL consultato il 13 luglio 2012.
  10. ^ Stories with microorganisms…., in Chemistry-Didactics-Ecology-Metrology, vol. 22, 1–2, December 2017, pp. 59–68, DOI:10.1515/cdem-2017-0003.
  11. ^ La Moisissure et la Bactérie: Deconstructing the fable of the discovery of penicillin by Ernest Duchesne, in Endeavour, vol. 40, n. 3, September 2016, pp. 188–200, DOI:10.1016/j.endeavour.2016.07.005, PMID 27496372.
  12. ^ Gwyn MacFarlane, Howard Florey : the making of a great scientist, Oxford, Oxford Univ. Pr., 1979, pp. 14–15, ISBN 978-0-19-858161-1.
  13. ^ www1.umn.edu, http://www1.umn.edu/ships/updates/fleming.htm. URL consultato il 9 febbraio 2010.
  14. ^ 'At once Pasteur jumped to a fine idea: "If the harmless bugs from the air choke out the anthrax bacilli in the bottle, they will do it in the body too! It is a kind of dog-eat-dog!” shouted Pasteur, (…) Pasteur gravely announced: "That there were high hopes for the cure of disease from this experiment", but that is the last you hear of it, for Pasteur was never a man to give the world of science the benefit of studying his failures.'
  15. ^ Tiberio, Vincenzo (1895) "Sugli estratti di alcune muffe" [On the extracts of certain moulds], Annali d'Igiene Sperimentale (Annals of Experimental Hygiene), 2nd series, 5 : 91–103. From p. 95: "Risulta chiaro da queste osservazioni che nella sostanza cellulare delle muffe esaminate son contenuti dei principi solubili in acqua, forniti di azione battericida: sotto questo riguardo sono più attivi o in maggior copia quelli dell' Asp. flavescens, meno quelli del Mu. mucedo e del Penn. glaucum." (It follows clearly from these observations that in the cellular substance of the moulds examined are contained some water-soluble substances, provided with bactericidal action: in this respect are more active or in greater abundance those of Aspergillus flavescens; less, those of Mucor mucedo and Penicillium glaucum.)
  16. ^ Bucci R., Galli P. (2011) "Vincenzo Tiberio: a misunderstood researcher," Italian Journal of Public Health, 8 (4) : 404–406. (Accessed 1 May 2015)
  17. ^ almanacco.rm.cnr.it, http://www.almanacco.rm.cnr.it/reader/cw_usr_view_recensione?id_articolo=1704&giornale=1679. URL consultato il 13 luglio 2012.
  18. ^ festival2011.festivalscienza.it, http://festival2011.festivalscienza.it/site/home/programma-2011/eventi-per-tipo/conferenze/vincenzo-tiberio-vero-scopritore-degli-antibiotici.html. URL consultato il 13 luglio 2012.
  19. ^ Antagonism between moulds and bacteria. An English translation by Michael Witty., Fort Myers, 2013.
  20. ^ (FR) Contribution à l'étude de la concurrence vitale chez les micro-organismes : antagonisme entre les moisissures et les microbes, Lyon, France, Alexandre Rey, 1897.
  21. ^ (FR) Jean Pouillard, Une découverte oubliée : la thèse de médecine du docteur Ernest Duchesne (1874–1912) (PDF), in Histoire des Sciences Médicales, XXXVI, n. 1, pp. 11–20 (archiviato dall'url originale il 13 July 2019).
  22. ^ (EN) Milton Wainwright, André Gratia (1893–1950): Forgotten Pioneer of Research into Antimicrobial Agents, in Journal of Medical Biography, vol. 8, n. 1, 2000, pp. 39–42, DOI:10.1177/096777200000800108, PMID 11608911.
  23. ^ (EN) C de Scoville, C De Brouwer e M Dujardin, Nobel chronicle: Fleming and Gratia, in The Lancet, vol. 354, n. 9174, 1999, p. 258, DOI:10.1016/S0140-6736(05)66334-9, PMID 10421340.
  24. ^ a b c d e f Reappraising Fleming's snot and mould, in Science Vision, vol. 20, n. 1, 2020, pp. 29–42, DOI:10.33493/scivis.20.01.03.
  25. ^ (EN) Variant colonies of Staphylococcus aureus, in The Journal of Pathology and Bacteriology, vol. 30, n. 2, 1927, pp. 261–269, DOI:10.1002/path.1700300204.
  26. ^ a b c d The true history of the discovery of penicillin, with refutation of the misinformation in the literature, in British Journal of Biomedical Science, vol. 56, n. 2, 1999, pp. 83–93, PMID 10695047.
  27. ^ (EN) The mystery of the plate: Fleming's discovery and contribution to the early development of penicillin, in Journal of Medical Biography, vol. 1, n. 1, February 1993, pp. 59–65, DOI:10.1177/096777209300100113, PMID 11639213.
  28. ^ a b The mystery of the plate: Fleming's discovery and contribution to the early development of penicillin, in Journal of Medical Biography, vol. 1, n. 1, February 1993, pp. 59–65, DOI:10.1177/096777209300100113, PMID 11639213.
  29. ^ Pioneers in Antimicrobial Chemotherapy, in The Journal of the Association of Physicians of India, vol. 63, n. 9, September 2015, pp. 90–1, PMID 27608881.
  30. ^ Alexander Fleming (1881–1955): Discoverer of penicillin, in Singapore Medical Journal, vol. 56, n. 7, July 2015, pp. 366–7, DOI:10.11622/smedj.2015105, PMID 26243971.
  31. ^ A re-appraisal of the conventional history of antibiosis and Penicillin, in Mycoses, vol. 60, n. 5, May 2017, pp. 343–347, DOI:10.1111/myc.12599, PMID 28144986.
  32. ^ Alexander Fleming, On the antibacterial action of cultures of a Penicillium, with special reference to their use in the isolation of B. influenzae, in British Journal of Experimental Pathology, vol. 10, n. 3, 1929, pp. 226–236, PMID 2048009.; Reprinted as On the antibacterial action of cultures of a Penicillium, with special reference to their use in the isolation of B. influenzae, in British Journal of Experimental Pathology, vol. 60, n. 1, 1979, pp. 3–13.
  33. ^ www.nobelprize.org, https://www.nobelprize.org/prizes/medicine/1945/fleming/lecture/. URL consultato il 19 July 2020.
  34. ^ Kristin Hess, Fleming vs. Florey: It All Comes Down to the Mold, in The Histories, vol. 2, n. 1, 2019, pp. 3–10.
  35. ^ The yellow brick road to penicillin: a story of serendipity, in Mayo Clinic Proceedings, vol. 72, n. 7, July 1997, pp. 683–7, DOI:10.4065/72.7.683, PMID 9212774.
  36. ^ Irish contributions to the origins of antibiotics, in Irish Journal of Medical Science, vol. 177, n. 2, June 2008, pp. 87–92, DOI:10.1007/s11845-008-0139-x, PMID 18347757.
  37. ^ (EN) Appendix. History of species used and Dr. Thom's diagnoses of species, in Philosophical Transactions of the Royal Society of London. Series B, Containing Papers of a Biological Character, vol. 220, 468–473, 1931, pp. 83–92, DOI:10.1098/rstb.1931.0015.
  38. ^ Charles Thom, Mycology Presents Penicillin, in Mycologia, vol. 37, n. 4, 1945, pp. 460–475, DOI:10.2307/3754632.
  39. ^ A taxonomic study of the Penicillium chrysogenum series, in Antonie van Leeuwenhoek, vol. 43, n. 2, 1977, pp. 169–75, DOI:10.1007/BF00395671, PMID 413477.
  40. ^ International Association of Plant Taxonomy, https://www.iapt-taxon.org/icbn/main.htm. URL consultato il 17 June 2020.
  41. ^ New penicillin-producing Penicillium species and an overview of section Chrysogena, in Persoonia, vol. 29, n. 1, December 2012, pp. 78–100, DOI:10.3767/003158512X660571, PMID 23606767.
  42. ^ New light on the history of penicillin, in Medical History, vol. 26, n. 1, January 1982, pp. 1–24, DOI:10.1017/S0025727300040758, PMID 7047933.
  43. ^ Merlin Pryce (1902–1976) and penicillin: an abiding mystery, in Vesalius, vol. 8, n. 2, December 2002, pp. 6–25, PMID 12713008.
  44. ^ (EN) Obituary: C. J. La Touche, in Medical Mycology, vol. 19, n. 2, 1981, p. 164, DOI:10.1080/00362178185380261.
  45. ^ a b Alexander Fleming, On the antibacterial action of cultures of a Penicillium, with special reference to their use in the isolation of B. influenzae, in British Journal of Experimental Pathology, vol. 10, n. 3, 1929, pp. 226–236, PMID 2048009.; Reprint of On the antibacterial action of cultures of a Penicillium, with special reference to their use in the isolation of B. influenzae, in British Journal of Experimental Pathology, vol. 60, n. 1, 1979, pp. 3–13.
  46. ^ Annotations, in British Medical Journal, vol. 2, n. 4208, August 1941, pp. 310–2, DOI:10.1136/bmj.2.4208.310, PMID 20783842.
  47. ^ Penicillin, in British Medical Journal, vol. 2, n. 4210, September 1941, p. 386, DOI:10.1136/bmj.2.4210.386.
  48. ^ a b c d e Robert Gaynes, The Discovery of Penicillin—New Insights After More Than 75 Years of Clinical Use, in Emerging Infectious Diseases, vol. 23, n. 5, 2017, pp. 849–853, DOI:10.3201/eid2305.161556.
  49. ^ Kok-Fai Kong, Lisa Schneper e Kalai Mathee, Beta-lactam antibiotics: from antibiosis to resistance and bacteriology, in Acta Pathologica, Microbiologica, et Immunologica Scandinavica, vol. 118, n. 1, 2010, pp. 1–36, DOI:10.1111/j.1600-0463.2009.02563.x, PMID 20041868.
  50. ^ David S. Jones e John H. Jones, Sir Edward Penley Abraham CBE. 10 June 1913 – 9 May 1999, in Biographical Memoirs of Fellows of the Royal Society, vol. 60, 1º dicembre 2014, pp. 5–22, DOI:10.1098/rsbm.2014.0002, ISSN 0080-4606 (WC · ACNP).
  51. ^ www.nobelprize.org, https://www.nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/1945/chain-lecture.html. URL consultato il 10 maggio 2017.
  52. ^ a b E. Chain, H. W. Florey e M. B. Adelaide, Penicillin as a chemotherapeutic agent, in The Lancet, vol. 236, n. 6104, 1940, pp. 226–228, DOI:10.1016/S0140-6736(01)08728-1, PMID 8403666.
  53. ^ Further observations on penicillin. 1941, in European Journal of Clinical Pharmacology, vol. 42, n. 1, 1941, pp. 3–9, DOI:10.1016/S0140-6736(00)72122-2, PMID 1541313.
  54. ^ (EN) E. P. Abraham e E. Chain, Purification of Penicillin, in Nature, vol. 149, n. 3777, 1942, pp. 328–328, DOI:10.1038/149328b0.
  55. ^ (EN) E. P. Abraham, W. Baker e E. Chain, Nitrogenous Character of Penicillin, in Nature, vol. 149, n. 3778, 1942, pp. 356–356, DOI:10.1038/149356a0.
  56. ^ Purification and Some Physical and Chemical Properties of Penicillin, in British Journal of Experimental Pathology, vol. 23, n. 3, 1942, pp. 103–119.
  57. ^ R. Hare, New light on the history of penicillin, in Medical History, vol. 26, n. 1, 1982, pp. 1–24, DOI:10.1017/s0025727300040758, PMID 7047933.
  58. ^ (EN) M. Wainwright e H.T. Swan, The Sheffield penicillin story, in Mycologist, vol. 1, n. 1, 1987, pp. 28–30, DOI:10.1016/S0269-915X(87)80022-8.
  59. ^ (EN) Milton Wainwright, Besredka's "antivirus" in relation to Fleming's initial views on the nature of penicillin, in Medical History, vol. 34, n. 1, 1990, pp. 79–85, DOI:10.1017/S0025727300050286, PMID 2405221.
  60. ^ M Wainwright, The history of the therapeutic use of crude penicillin., in Medical History, vol. 31, n. 1, 1987, pp. 41–50, DOI:10.1017/s0025727300046305, PMID 3543562.
  61. ^ (EN) Milton Wainwright, Moulds in Folk Medicine, in Folklore, vol. 100, n. 2, 1989, pp. 162–166, DOI:10.1080/0015587X.1989.9715763.
  62. ^ blackwells.co.uk, https://blackwells.co.uk/jsp/promo/umh.jsp?action=more&id=18. URL consultato il 19 ottobre 2020.
  63. ^ C.G. Paine and the earliest surviving clinical records of penicillin therapy, in Medical History, vol. 30, n. 1, January 1986, pp. 42–56, DOI:10.1017/S0025727300045026, PMID 3511336.
  64. ^ (EN) Sulaiman Ali Alharbi, Milton Wainwright e Tahani Awad Alahmadi, What if Fleming had not discovered penicillin?, in Saudi Journal of Biological Sciences, vol. 21, n. 4, 2014, pp. 289–293, DOI:10.1016/j.sjbs.2013.12.007, PMID 25183937.
  65. ^ a b sciencewatch.com, 2007, http://www.sciencewatch.com/interviews/norman_heatly.htm. URL consultato il 13 febbraio 2007.
  66. ^ Stuart B. Levy, The Antibiotic Paradox: How the Misuse of Antibiotics Destroys Their Curative Powers, Da Capo Press, 2002, pp. 5–7, ISBN 978-0-7382-0440-6.
  67. ^ (EN) B. Lee Ligon, Sir Alexander Fleming: Scottish researcher who discovered penicillin, in Seminars in Pediatric Infectious Diseases, vol. 15, n. 1, 2004, pp. 58–64, DOI:10.1053/j.spid.2004.02.002, PMID 15175996.
  68. ^ a b V. D. Allison, Personal recollections of Sir Almroth Wright and Sir Alexander Fleming., in The Ulster Medical Journal, vol. 43, n. 2, 1974, pp. 89–98, PMID 4612919.
  69. ^ (EN) vol. 49, DOI:10.1016/s0065-2164(01)49013-7, ISBN 978-0-12-002649-4, PMID 11757350, https://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0065216401490137.
  70. ^ (EN) H. Cairns, W. S. Lewin e E. S. Duthie, Pneumococcal Meningitis Treated with Penicillin, in The Lancet, vol. 243, n. 6299, 1944, pp. 655–659, DOI:10.1016/S0140-6736(00)77085-1.
  71. ^ (EN) Alexander Fleming, Streptococcal Meningitis treated With Penicillin., in The Lancet, vol. 242, n. 6267, 1943, pp. 434–438, DOI:10.1016/S0140-6736(00)87452-8.
  72. ^ John A. Mathews, The Birth of the Biotechnology Era: Penicillin in Australia, 1943–80, in Prometheus, vol. 26, n. 4, 2008, pp. 317–333, DOI:10.1080/08109020802459306.
  73. ^ (EN) Peter Baldry, The Battle Against Bacteria: A Fresh Look, CUP Archive, 1976, p. 115, ISBN 978-0-521-21268-7.
  74. ^ (EN) HistoryNet, https://www.historynet.com/here-is-where-penicillin-comes-to-peoria.htm. URL consultato il 4 gennaio 2021.
  75. ^ a b acs.org, https://www.acs.org/content/acs/en/education/whatischemistry/landmarks/flemingpenicillin.html. URL consultato il 15 July 2019.
  76. ^ a b P. Neushul, Science, government, and the mass production of penicillin, in Journal of the History of Medicine and Allied Sciences, vol. 48, n. 4, 1993, pp. 371–395, DOI:10.1093/jhmas/48.4.371, PMID 8283024.
  77. ^ (EN) Ronald Bentley, Different roads to discovery; Prontosil (hence sulfa drugs) and penicillin (hence β-lactams), in Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology, vol. 36, n. 6, 2009, pp. 775–786, DOI:10.1007/s10295-009-0553-8.
  78. ^ (EN) Nelson Kardos e Arnold L. Demain, Penicillin: the medicine with the greatest impact on therapeutic outcomes, in Applied Microbiology and Biotechnology, vol. 92, n. 4, 2011, pp. 677–687, DOI:10.1007/s00253-011-3587-6.
  79. ^ (EN) Journal of Orthopaedic Surgery, https://search.proquest.com/openview/d5ed3749f4eb8b5b8bbe9d4ac3d955fd/1?pq-origsite=gscholar&cbl=11254. URL consultato il 4 gennaio 2021.
  80. ^ (EN) DOI:10.1007/978-3-319-29055-3_3, ISBN 978-3-319-29053-9, http://link.springer.com/10.1007/978-3-319-29055-3_3.
  81. ^ (1) botit.botany.wisc.edu, http://botit.botany.wisc.edu/toms_fungi/nov2003.html.

    (2) historicpeoria.com, http://www.historicpeoria.com/entry.php?eid=144&catid=1&cid=1. URL consultato il 6 June 2007.
  82. ^ pfizer.com, 2009, http://www.pfizer.com/about/history/1900_1950.jsp. URL consultato il 2 agosto 2009.
  83. ^ news-medical.net, https://www.news-medical.net/health/Penicillin-Production.aspx.
  84. ^ a b (EN) American Chemical Society, https://www.acs.org/content/acs/en/education/whatischemistry/landmarks/flemingpenicillin.html. URL consultato il 18 marzo 2019.
  85. ^ David S. Jones e John H. Jones, Sir Edward Penley Abraham CBE. 10 June 1913 – 9 May 1999, in Biographical Memoirs of Fellows of the Royal Society, vol. 60, 1º dicembre 2014, pp. 5–22, DOI:10.1098/rsbm.2014.0002.
  86. ^ C&EN, http://cen.xraycrystals.org/penicillin.html. URL consultato il 21 August 2018.
  87. ^ The X-ray analysis of the structure of penicillin, in Advancement of Science, vol. 6, n. 22, July 1949, pp. 85–9, PMID 18134678.
  88. ^ Robert Robinson and penicillin: an unnoticed document in the saga of its structure, in Journal of Peptide Science, vol. 13, n. 12, December 2007, pp. 769–75, DOI:10.1002/psc.888, PMID 17890642.
  89. ^ Committee on Medical Research e Medical Research Council, Chemistry of penicillin, in Science, vol. 102, n. 2660, 1945, pp. 627–629, DOI:10.1126/science.102.2660.627, PMID 17788243.
  90. ^ (EN) E Chain, The chemistry of penicillin, in Annual Review of Biochemistry, vol. 17, n. 1, 1948, pp. 657–704, DOI:10.1146/annurev.bi.17.070148.003301, PMID 18893607.
  91. ^ (DE) Serie Forschung und Industrie: Sandoz, in Medical Tribune, n. 45/2005. URL consultato il 2 agosto 2009.
  92. ^ John C. Sheehan e Kenneth R. H enery-Logan, The Total Synthesis of Penicillin V, in Journal of the American Chemical Society, vol. 79, n. 5, March 5, 1957, pp. 1262–1263, DOI:10.1021/ja01562a063.
  93. ^ John C. Sheehan e Kenneth R. Henery-Loganm, The Total Synthesis of Penicillin V, in Journal of the American Chemical Society, vol. 81, n. 12, June 20, 1959, pp. 3089–3094, DOI:10.1021/ja01521a044.
  94. ^ nap.edu, http://www.nap.edu/readingroom.php?book=biomems&page=jsheehan.html. URL consultato il January 28, 2013.
  95. ^ <44::AID-ANIE44>3.0.CO;2-L The Art and Science of Total Synthesis at the Dawn of the Twenty-First Century, in Angewandte Chemie, vol. 39, n. 1, January 2000, pp. 44–122, DOI:10.1002/(SICI)1521-3773(20000103)39:1<44::AID-ANIE44>3.0.CO;2-L, PMID 10649349.
  96. ^ (EN) John C. Sheehan e Kenneth R. Henery Logan, A general synthesis of the penicillins, in Journal of the American Chemical Society, vol. 81, n. 21, 1959, pp. 5838–5839, DOI:10.1021/ja01530a079.
  97. ^ (EN) John C. Sheehan e Kenneth R. Henery-Logan, The Total and Partial General Syntheses of the Penicillins, in Journal of the American Chemical Society, vol. 84, n. 15, 1962, pp. 2983–2990, DOI:10.1021/ja00874a029.
  98. ^ (EN) The Synthetic Penicillins, in Molecular Modification in Drug Design, Molecular Modification in Drug Design, collana Advances in Chemistry, vol. 45, Washington, D.C., American Chemical Society, 1964, pp. 15–24, DOI:10.1021/ba-1964-0045.ch002, ISBN 978-0-8412-0046-3.
  99. ^ a b Development of the semi-synthetic penicillins and cephalosporins, in International Journal of Antimicrobial Agents, vol. 31, n. 3, March 2008, pp. 189–92, DOI:10.1016/j.ijantimicag.2007.11.010, PMID 18248798.
  100. ^ F. R. Batchelor, F. P. Doyle e J. H. Nayler, Synthesis of penicillin: 6-aminopenicillanic acid in penicillin fermentations, in Nature, vol. 183, n. 4656, 1959, pp. 257–258, DOI:10.1038/183257b0, PMID 13622762.
  101. ^ G. N. Rolinson e A. M. Geddes, The 50th anniversary of the discovery of 6-aminopenicillanic acid (6-APA), in International Journal of Antimicrobial Agents, vol. 29, n. 1, 2007, pp. 3–8, DOI:10.1016/j.ijantimicag.2006.09.003, PMID 17137753.
  102. ^ Methicillin-resistant Staphylococcus aureus emerged long before the introduction of methicillin into clinical practice, in Genome Biology, vol. 18, n. 1, July 2017, p. 130, DOI:10.1186/s13059-017-1252-9, PMID 28724393.
  103. ^ Moyer AJ, 2442141.
  104. ^ Moyer AJ, 2443989.
  105. ^ Moyer AJ, 2476107.
  106. ^ Pharmacology and chemotherapy of ampicillin--a new broad-spectrum penicillin, in British Journal of Pharmacology and Chemotherapy, vol. 18, n. 2, April 1962, pp. 356–69, DOI:10.1111/j.1476-5381.1962.tb01416.x, PMID 13859205.
  107. ^ (EN) Methicillin-Resistant Staphylococci in a General Hospital, in Lancet, vol. 1, n. 7385, March 1965, pp. 595–7, DOI:10.1016/S0140-6736(65)91165-7, PMID 14250094.
  108. ^ Cross-reactivity of beta-lactam antibiotics, in Proceedings, vol. 14, n. 1, January 2001, pp. 106–7, DOI:10.1080/08998280.2001.11927741, PMID 16369597.
  109. ^ (EN) NobelPrize.org, https://www.nobelprize.org/prizes/medicine/1945/fleming/lecture/. URL consultato il 17 ottobre 2020.
  110. ^ An enzyme from bacteria able to destroy penicillin., in Nature, vol. 146, n. 3713, 1940, p. 837, Bibcode:1940Natur.146..837A, DOI:10.1038/146837a0.
  111. ^ An enzyme from bacteria able to destroy penicillin, in Nature, vol. 10, n. 4, 1940, pp. 677–8, DOI:10.1038/146837a0, PMID 3055168.
  112. ^ Antimicrobial resistance: the example of Staphylococcus aureus, in The Journal of Clinical Investigation, vol. 111, n. 9, May 2003, pp. 1265–73, DOI:10.1172/JCI18535, PMID 12727914.

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