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Al campionato parteciparono undici squadre, per la prima volta divise in due gironi all'italiana formati su base meritocratica.
Nel girone 1 Elite figuravano le Red Panthers, campionesse uscenti, con le prime cinque classificate 2008-09 (Template:Rugby Riviera del Brenta, Red & Blu, Monza e Le Lupe) e la neo-iscritta Valsugana.
Il girone 2 era invece composto da Pesaro, penultimo classificato nella stagione 2008-09, e da altre quattro neo-iscritte: Benevento, Sesto, Perugia Ragazze e Valledora[2].
La regular season si tenne con formula all'italiana dall'11 ottobre 2009 al 28 marzo 2010 con una pausa di due mesi durante lo svolgimento del Sei Nazioni femminile. Al termine della prima fase le squadre classificatesi al 1º, 2º e 3º posto del Girone 1 Elite accedettero alle semifinali, mentre per determinare la quarta semifinalista si disputò uno spareggio tra la 4ª classificata del Girone 1 Elite e la 1ª classificata del Girone 2, in partita unica in campo neutro[2].