Amplificazione isotermica mediata dal loop
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(Lateral Flow Device= dispositivo di flusso laterale)[1]
L'amplificazione isotermica mediata da loop (LAMP) è una tecnica in provetta singola utilizzata per l'amplificazione del DNA.[2][3] Essa è un'alternativa a basso costo per rilevare alcune malattie; questa tecnica è diversa dall'amplificazione isotermica mediata dal loop di trascrizione inversa (RT-LAMP) che combina la LAMP con una fase di trascrizione inversa e serve per consentire il rilevamento dell'RNA.
La LAMP è una tecnica di amplificazione degli acidi nucleici isotermica. Contrariamente alla tecnologia della reazione a catena della polimerasi o (PCR), in cui la reazione viene eseguita con una serie di fasi o cicli di temperatura alternata, l'amplificazione isotermica viene eseguita a temperatura costante e non richiede un termociclatore.
Vantaggi[modifica | modifica wikitesto]
I vantaggi della LAMP sono: - l’isotermicità della reazione, che non richiede un termociclatore; - l’utilizzo di 4/6 oligonucleotidi aumenta la specificità del segmento amplificato; - può essere utilizzata anche su DNA non puro; - i loop primer aumentano notevolmente il tasso di replicazione; - il DNA può essere visualizzato anche ad occhio nudo o tramite turbidimetro; - può essere applicata anche all’RNA con semplice aggiunta di retrotrascrittasi;
rispetto alla PCR.
Svantaggi[modifica | modifica wikitesto]
Note[modifica | modifica wikitesto]
- ^ Il dosaggio LAMP è in grado di rilevare fino a 40 copie di mtDNA (DNA mitocodriale) dal DNA umano, con una gamma dinamica da 40 copie a 40 000 copie per reazione.
- ^ Loop-mediated isothermal amplification of DNA, in Nucleic Acids Res., vol. 28, n. 12, 2000, pp. 63e–63, DOI:10.1093/nar/28.12.e63, PMID 10871386.
- ^ Notomi T, Brevetto Hase T, 6410278.